Inżynieria Genetyczna - Egzamin 2015, Biotechnologia PWR, Semestr 7, Inżynieria Genetyczna - Wykład, ...
[ Pobierz całość w formacie PDF ]
//-->INŻYNIERIA GENETYCZNA - EGZAMINTWÓJ BIOTECHNOLOGhttps://www.facebook.com/twoj.biotechnologUczelnia: Politechnika Wrocławska Wydział: Chemiczny Kierunek: BiotechnologiaKurs: Inżynieria Genetyczna – Wykład Semestr: 6 prowadzący: prof.dr hab.inż. AndrzejOżyharOpracowanie zawiera: szkice rozwiązań zadań (44 strony A4) ze wszystkich egzaminów zostatnich lat.Opracował: Twój Biotechnolog.Więcej zadań na stronie:https://www.facebook.com/twoj.biotechnologUwaga: Notatka może zawierać błędy lub być niekompletna. Każdy korzysta z niej nawłasną odpowiedzialność. Notatka objęta jest prawem autorskim. Wszelkie prawazastrzeżone. Kopiowanie i rozpowszechnianie zabronione. Publikacja przeznaczona jedyniedla klientów indywidualnych. Zakaz rozpowszechniania i udostępniania we wszystkichserwisach bibliotecznych.Więcej opracowań na stronie:Publikacja objęta jest prawem autorskim. Wszelkie prawa zastrzeżone. Kopiowanie i rozpowszechnianie zabronione. Publikacja przeznaczona jedynie dla klientów indywidualnych.Zakaz rozpowszechniania i udostępniania w serwisach bibliotecznychINŻYNIERIA GENETYCZNA TERMIN 1 20141.Który z podanych niżej związków jest odpowiednim substratem do radioaktywnegoznakowania 5’ końca startera, który zostanie wykorzystany do PCR, mającego na celuotrzymanie fragmentu DNA zawierającego znacznik 32P na jednym z 5’ końców:a) dATP, znakowany 32P w pozycji gammab) ATP, znakowany w pozycji alfac) DTP, znakowany w pozycji alfad) [alfa-32P]-dATPe)[gamma-32P]-ATPAby komórki E.Coli uległy transformacji cząsteczkami rekombinowanych plazmidówkomórki te muszą być:a) Komórkami szczepu patogennegob) W fazie stacjonarnejc) Kompetentned) Zróżnicowanee) Poddane szokowi termicznemu, tj. umieszczone w temperaturze 40 st. C2.3.Które z poniższych elementów są konieczne do przeprowadzenia ekspresji sekwencjikodującej genu eukariotycznego w komórce bakteryjnej:a) sekwencja wiążąca rybosomyb) silny i jednocześnie regulowany promotor prokariotycznyc) prokariotyczna sekwencja terminacji transkrypcjid) sekwencje intronowie) eukariotyczna polimeraza RNAPublikacja objęta jest prawem autorskim. Wszelkie prawa zastrzeżone. Kopiowanie i rozpowszechnianie zabronione. Publikacja przeznaczona jedynie dla klientów indywidualnych.Zakaz rozpowszechniania i udostępniania w serwisach bibliotecznychGRUPA E EGZAMIN POPRAWKOWY - TERMIN 31. Wektor plazmidowy poddany linearyzacji enzymem EcoRI został, bezpośrednio poinaktywacji enzymu, użyty do ligacji z ds. DNA powstałym w wyniku hybrydyzacji dwóchsyntetycznych oligonukleotydów (insert); syntetyczny ds. DNA został tak zaprojektowany,iż posiada końce identyczne z końcami wektora (EcoRI). Mieszaniną koligacyjną poddanotransformacji komórki bakteryjne i wysiano je na podłoże zawierające odpowiedni dlawektora antybiotyk. Które z podanych poniżej twierdzeń są prawdziwe ( zakładamy, żeanalizie poddano odpowiednio dużą ilość klonów):zadanie to wystąpiło również na jednym z terminów w takiej samej formie, ale należałozaznaczyć odpowiedziNIEPRAWDZIWEa. Pośród powstałych klonów można było zaobserwować klony zawierające wektorpozbawiony insertuGeneralnie w tym wypadku to nie insert, a wektor jest odpowiedzalnyza przeżycie komórki na podłożu, wektor może być poddany samoligacji i taka komórkaprzeżyje na antybiotyku. W warunkach zadania jest mowa tylko o jednym antybiotyku, naktóry odporność nadaje wektor. Na podłożu więc wyrosną komórki które przyjeły wektor inie ma znaczenia czy zawierają one insert, czy go nie zawierają. W tym wypadku insert nienadaje odporności na antybiotyk.b. Pośród powstałych klonów można było zaobserwować klony zawierającerekombinowany wektor z wbudowanym jednym insertemZacznijmy od tego że na podłożumogą wyrosnąć komórki z wbudowanym jednym insertem. Jest to naturalną konsekwencjąprzyjęcia przez komórkę wektora z insertem. Na podłożu mogą również pojawić siękomórki z samym wektorem, a pozbawione insertu. Tak dobrane są warunki zadania.Wszystko rozbija się o słówko mogą. “Mogą” nie nawiązuje do wszystkich możliwości,dotyczy tylko tej stricte jednej sytuacji. I dlatego, wg. mnie ta odpowiedź aczkolwiekbezsensowna, jest prawdziwa.c. pośród powstałych klonów można było zaobserwowac wektor zawierajacy wiecej niżjeden fragment / wśród powstałych klonów można było zaobserwować klony zawierającewektor z wbudowanymi kilkoma fragmentaminie jest to (raczej) możliwe aby doszło dowstawienia w miejsce kilku insertów.d. Ligacji insertu i cząsteczki wektora towarzyszyło powstanie 4 wiązań fosfodiestrowychLigaza wymaga dwuniciowego DNAnastępuje ligacja ds. DNA (2 nici) po obu stronach (2końce), sumarycznie daje to 4 wiązania.e. Ligacji insertu i cząsteczki wektora towarzyszyło powstanie 2 wiązań fosfodiestrowychPublikacja objęta jest prawem autorskim. Wszelkie prawa zastrzeżone. Kopiowanie i rozpowszechnianie zabronione. Publikacja przeznaczona jedynie dla klientów indywidualnych.Zakaz rozpowszechniania i udostępniania w serwisach bibliotecznych2. Które z twierdzeń dotyczących reakcji łańcuchowej polimeryzacji (PCR) są prawdziwe?a. Cykl PCR obejmuje trzy etapy: denaturację w temperaturze 95 st. C, hybrydyzację wtemperaturze zależnej od długości startera oraz elongację, którą zwykle prowadzi się wtemperaturze 72 st. Cwykład Ożyhara, Wykład VI 19.04.2013, wykład o PCR“Hybrydyzacja starterów (3-065 st. C), temperatura zależy od długości starterów”; 72 st. Cdla polimerazy Taq.b. Mieszanina reakcyjna PCR zawiera m. in. trifosforany czterech rybonukleotydów ipolimerazę DNAdeoksyrybonukleotydów oraz termostabilną polimerazę DNA Taq(pochodzi z bakterii termofilnych Thermus aquaticus), plus 2 startery!c. Może być wykorzystana do wykrywania rearanżacji chromosomalnych powodującychniektóre formy białaczekPCR jest doskonałą metodą do wykrywania białaczekspowodowanych rearanżacją chromosomów Stryer str 142.d. PCR może być wykorzystywany podczas mutagenezy ukierunkowanej sterowanej przezoligonukleotydystrona204 GC, może być, ale wtedy tylko jedna mutacja na eksperymente. W przeciwieństwie do reakcji sekwencjonowania DNA metodą dideoksy, PCR wymagadwóch starterów, które są do siebie komplementarnestartery nie mogą byc do siebiekomplementarne.3. Wektor kosmidowy został poddany ligacji z fragmentami DNA o przypadkowej(różnej)długości w celu przygotowania biblioteki genomowej człowieka. Maksymalnadługość insertów składających się na bibliotekę będzie najprawdopodobniej wynosić:a. 15 kbb. 40 kbKosmid- wektor do klonowania składający się z miejsca cos λ wklejonego wplazmid. Używany do klonowania fragmentów DNA o wiekości do 40.000 par zasad (40kb).c. 150 kbd. 23 kbe. 8 kbSpodobało ci się?Chcesz więcej?Zamów Opracowanie!1. Polub i udostępnij nasz fanpage -https://www.facebook.com/twoj.biotechnolog2. Napisz do nas na facebook.com lub chomikuj.pl -3. Zamów Opracowanie!Publikacja objęta jest prawem autorskim. Wszelkie prawa zastrzeżone. Kopiowanie i rozpowszechnianie zabronione. Publikacja przeznaczona jedynie dla klientów indywidualnych.Zakaz rozpowszechniania i udostępniania w serwisach bibliotecznych
[ Pobierz całość w formacie PDF ]